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新手如何培養(yǎng)細(xì)胞?
  • 發(fā)布日期:2023-11-06      瀏覽次數(shù):718
    • 細(xì)胞培養(yǎng)基本概念:

      細(xì)胞培養(yǎng)
      將活細(xì)胞(尤其是分散的細(xì)胞)在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法稱為細(xì)胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離(散)細(xì)胞培養(yǎng),廣義的還包括單(個(gè))細(xì)胞培養(yǎng)又稱克隆,是指單個(gè)細(xì)胞通過有絲分裂形成的細(xì)胞群體。


      原代細(xì)胞
      初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割,任其生長(zhǎng)繁殖而不更換生長(zhǎng)器皿。
       
      傳代培養(yǎng)
      隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)、細(xì)胞不斷分裂繁殖,細(xì)胞之間相互接觸會(huì)發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營(yíng)養(yǎng)物逐漸不足,代謝產(chǎn)物不斷累積,不利于細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)。在這種情況下,需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接到培養(yǎng)器皿中進(jìn)行再培養(yǎng)。
       
      細(xì)胞系
      原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)后所繁殖的細(xì)胞群體。狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義的是指可傳代的細(xì)胞。正常細(xì)胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會(huì)喪失增殖的能力,這是一個(gè)由遺傳決定的事件,被稱為衰老。這種細(xì)胞系被稱為有限細(xì)胞系;一些細(xì)胞系會(huì)通過轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约?xì)胞系,這一過程可自然發(fā)生,也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細(xì)胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后就成為連續(xù)細(xì)胞系。

       

      細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境:

      細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的主要要求是時(shí)時(shí)維持細(xì)胞培養(yǎng)工作區(qū)域處于無菌狀態(tài),獲得無菌條件的方式就是使用細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)。
      細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)應(yīng)足夠一人使用,內(nèi)外部均采用易清潔設(shè)計(jì),具有充足的照明,使用舒適。
      使用過程中需保持細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)內(nèi)工作空間整潔有序,將所有物品放在直視范圍內(nèi),便于取用。使用前向放入細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)內(nèi)的物品噴灑70%的乙醇,擦拭清潔,進(jìn)行消毒。

      細(xì)胞培養(yǎng)通超凈臺(tái)的物品擺放一般遵循以下右手使用習(xí)慣,可根據(jù)特殊實(shí)驗(yàn)中增加的物品進(jìn)行相應(yīng)的適當(dāng)改動(dòng)。

       

      超凈臺(tái)中部
      擺放細(xì)胞培養(yǎng)類耗材。耐思細(xì)胞培養(yǎng)類耗材除了板、瓶、皿等常規(guī)耗材,更具備高品質(zhì)大規(guī)模生物工藝器皿,規(guī)格全面,型號(hào)豐富。

       

      超凈臺(tái)右前方
      擺放移液耗材及器械,便于取用。耐思液體轉(zhuǎn)移類耗材多樣,移液吸頭、離心管、真空過濾器、血清移液管等。

       

      超凈臺(tái)右后方
      擺放生物試劑和培養(yǎng)基,便于吸取。耐思生物試劑類產(chǎn)品包含核酸提取與純化試劑、PCR/RT-PCR相關(guān)試劑、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)試劑、基因敲除試劑等。

       

      超凈臺(tái)中后部
      擺放試管架等,用于固定其他試劑。

       

      超凈臺(tái)左后方
      擺放小型容器,用于盛放廢液。


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